載體構建技術實驗原理
載體構建是分子生物學研究中最常用的實驗技術，可用于體外條件下基因（包括mRNA，lncRNA，circRNA，miRNA）的過表達、干擾、突變、插入或缺失實驗，或用于載體改造等。
在基因工程中，常用人工構建的含有多克隆位點和抗性基因的質粒作為載體。首先采用PCR等方法體外擴增外源的目標DNA片段，之后依靠限制性內切酶的切割和DNA連接酶的連接，將外源DNA片段構建到質粒上；質粒轉化大腸桿菌或者轉染細胞，可以使外源DNA片段復制或表達。
載體構建技術實驗流程
載體構建實驗服務信息
輝駿生物提供的主要載體類型有：真核表達載體，原核表達載體，慢病毒表達載體，慢病毒干擾載體，circRNA表達載體，熒光素酶報告基因載體，植物表達載體，克隆載體等（請詳詢銷售或客服人員）
項目名稱 | 客戶提供 | 結果交付 | 實驗周期 | 價格
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| 載體構建 | 待構建的基因模板（也可委托我方全基因合成）
待構建的載體（我方已有的載體可免費提供）
實驗信息表（基因序列，載體要求等）
質粒或甘油菌可用冰袋保存運輸 | 1、構建好的載體質粒約3ug
2、構建好的載體甘油菌1ml
3、載體圖譜
4、原始測序文件和拼接文件
5、實驗報告
| 2-4周 |
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載體構建技術服務*輝駿優勢
十年服務經驗，客戶成果發表在NatureMethods，Oncogene，Cell Research等高水平期刊上。
自有分子及細胞生物實驗平臺，能有效制定并執行最優的實驗路線。
售后技術支持將一直保持到客戶發表文章，確保客戶安心進行下游實驗及投稿。
載體構建實驗-客戶文章
【研究內容】：本研究通過基因表達檢測、原位雜交、雙熒光素酶、ChIP等實驗發現HBV相關性肝細胞癌的SALL4或PD-L1表達與miR-200C水平和患者生存期呈負相關，高水平miR-200C直接靶向CD274 (編碼PD-L1)來降低其表達。成年期HBV誘導導致STAT3激活，使SALL4蛋白重新表達，從而抑制miR-200c轉錄。HBV-pSTAT3-SALL4-miR-200C信號通路可調節PD-L1的表達，針對該通路的治療策略可能會逆轉病毒誘導的免疫衰竭。
使用技術：shRNA慢病毒載體構建技術服務、載體構建實驗
【研究內容】：本研究通過雙熒光素酶，ChIP，DNA pull down和RNA pull down，RIP等實驗發現lnc-GD2H在肌肉再生中的作用：在成肌細胞增殖過程中，c-Myc蛋白與lnc-GD2H啟動子結合并調節其轉錄，促進成肌細胞增殖；在成肌細胞分化過程中，lnc-GD2H與成肌細胞分化相關蛋白NACA相互作用，抑制其在Myog啟動子的富集，減輕NACA對Myog的抑制作用，促進Myog表達和成肌細胞分化。
使用技術：雙熒光素酶載體構建、ChIP、DNA pull down、RNA pull down，RIP
【研究內容】：本研究通過基因表達/敲除、細胞功能檢測，動物實驗，雙熒光素酶分析等實驗，發現人黑色素瘤中TLR4的表達與STAT3的激活/磷酸化呈正相關，TLR4配體通MYD88和TRIF激活黑色素瘤細胞中的STAT3，促進了腫瘤的生長。當抑制黑色素瘤中STAT3的功能時，TLR4激活產生的效應減弱，說明STAT3激活對TLR4信號介導的黑色素瘤發展至關重要，為黑色素瘤的病理生理學提供了新的線索。
使用技術：基因調取檢測服務、真核表達載體構建實驗
【研究內容】：本研究通過基因過表達、雙熒光素酶等實驗發現LncRNA ILF3-AS1在顳葉癲癇（TLE）患者的海馬和血清中水平升高，ILF3-AS1通過靶向miR-212誘導炎性細胞因子和MMP3、MMP9的表達。值得注意的是，針對ILF3-AS1/miR212/MMP3/9軸的治療策略可能是治療TLE的有效方法。
使用技術：真核表達載體構建檢測實驗、基因調取外包服務
【研究內容】：酪胺受體（TAR）可被酪胺（TA）或章魚胺（OA）激活，并已被證明與多種昆蟲的生理調節（如味覺反應、社會組織和學習行為）有關。作者在小菜蛾中新克隆得到一個酪胺受體基因Pxtar1，并在293T細胞中利用慢病毒進行了該基因的穩定表達，功能實驗也顯示酪胺可以激活PxTAR1受體，此外，作者還調查了Pxtar1在小菜蛾體內的表達模式。
使用技術：過表達慢病毒載體構建、慢病毒包裝
輝駿實力
實驗熱線：4006991663
