抗體在生物醫(yī)學(xué)研究、 診斷和治療中具有十分重要的地位。隨著對(duì)抗體需求量的日益增加，以及抗體測(cè)序、表達(dá)和純化技術(shù)的日益進(jìn)步，重組抗體的應(yīng)用也越來(lái)越廣泛。
重組抗體是指將抗體基因連入表達(dá)載體中，并將載體質(zhì)粒轉(zhuǎn)導(dǎo)到宿主細(xì)胞內(nèi)表達(dá)出的抗體產(chǎn)品。常見(jiàn)的宿主表達(dá)系統(tǒng)有細(xì)菌、酵母、哺乳動(dòng)物細(xì)胞、昆蟲(chóng)細(xì)胞等，其中哺乳動(dòng)物細(xì)胞，如CHO細(xì)胞和HEK293細(xì)胞，已成為重組抗體生產(chǎn)的首要表達(dá)系統(tǒng)。
重組抗體避免了傳統(tǒng)抗體的許多問(wèn)題，例如批次間差異大、價(jià)格高和倫理問(wèn)題。首先，在確定抗體的氨基酸序列后，可重復(fù)使用固定的序列生產(chǎn)重組抗體，大大提高了批次間的一致性；其次，重組抗體生產(chǎn)流程簡(jiǎn)單，可在短時(shí)間內(nèi)表達(dá)大量抗體；第三，通過(guò)對(duì)表達(dá)工藝的優(yōu)化，可將抗體表達(dá)水平提高到每升幾百毫克或幾克，大大降低抗體生產(chǎn)成本和價(jià)格。
抗體表達(dá)穩(wěn)轉(zhuǎn)株構(gòu)建（CHO細(xì)胞）技術(shù)原理
重組抗體的表達(dá)方式有瞬時(shí)表達(dá)和穩(wěn)定表達(dá)兩種。
輝駿生物的抗體表達(dá)穩(wěn)轉(zhuǎn)株構(gòu)建項(xiàng)目，利用轉(zhuǎn)座子系統(tǒng)將目標(biāo)抗體序列穩(wěn)定整合到細(xì)胞基因組中，通過(guò)抗性篩選，確保目標(biāo)序列不會(huì)隨著細(xì)胞分裂而丟失，能穩(wěn)定存在并持續(xù)表達(dá)重組抗體。
輝駿生物深耕抗體研究領(lǐng)域多年，積累了豐富的重組抗體表達(dá)經(jīng)驗(yàn)，通過(guò)對(duì)抗體表達(dá)載體骨架、細(xì)胞培養(yǎng)工藝、電轉(zhuǎn)條件和細(xì)胞篩選流程的優(yōu)化，可確保構(gòu)建的穩(wěn)轉(zhuǎn)細(xì)胞株高效表達(dá)重組抗體。
CHO細(xì)胞抗體表達(dá)穩(wěn)轉(zhuǎn)株構(gòu)建實(shí)驗(yàn)流程
抗體表達(dá)穩(wěn)轉(zhuǎn)株構(gòu)建（CHO細(xì)胞）* 輝駿服務(wù)內(nèi)容
服務(wù)內(nèi)容 | 交付內(nèi)容 | 周期 | 價(jià)格
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1. 基因合成和載體構(gòu)建 |
① 1株抗體表達(dá)穩(wěn)轉(zhuǎn)細(xì)胞株：2管細(xì)胞（1*10e7個(gè)/管）
② 構(gòu)建報(bào)告：包含細(xì)胞篩選、表達(dá)檢測(cè)等操作和結(jié)果
| 1-2周
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2. 質(zhì)粒電轉(zhuǎn)細(xì)胞、抗性篩選多克隆細(xì)胞池 | 6-9周 |
| 3. 單克隆細(xì)胞株篩選和抗體表達(dá)量檢測(cè) | 6-9周 |
抗體表達(dá)穩(wěn)轉(zhuǎn)株構(gòu)建（CHO細(xì)胞）* 輝駿服務(wù)優(yōu)勢(shì)
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效果保障，不成功不收費(fèi) 無(wú)效全額退款，100%保證目標(biāo)基因編輯/表達(dá)效果 | 效率保障 快至6周交付合格細(xì)胞株，高效實(shí)驗(yàn)流程 | 售后保障 實(shí)驗(yàn)疑問(wèn)隨時(shí)快速響應(yīng)，專(zhuān)業(yè)技術(shù)團(tuán)隊(duì)全程跟進(jìn) |
該抗體的表達(dá)量約390 mg/L，純化樣品SDS-PAGE電泳如圖所示：
M: Protein Molecular Weight Marker
1: 抗體稀釋至1mg/mL，取40μL，加10 μL 5× Loading Buffer，進(jìn)行12%的聚丙烯酰胺凝膠電泳，經(jīng)考馬斯亮藍(lán)R-250 染色
實(shí)驗(yàn)熱線(xiàn)：4006991663
