基因表達穩轉株構建(轉座子系統)技術原理
轉座子(transposons)是基因組中的“跳躍者”,能夠作為獨立的單位從基因組的一個位置移動到另一個位置,也被稱為“跳躍基因”。按照轉座機制的不同,可分為反轉錄轉座子和 DNA 轉座子兩類。
DNA轉座子(DNA transposons)通過“剪切-粘貼”機制進行,包括轉座酶表達、移動、插入三個階段。轉座酶識別轉座子兩端的末端重復序列(ITRs),將轉座子從原來的位置解離下來,再重新整合到基因組上。
目前在脊椎動物中應用最多的三大轉座子是:PiggyBac(PB)、睡美人Sleeping Beauty(SB)和Tol2。
輝駿生物利用PiggyBac轉座子系統進行基因表達穩轉株的構建,通過對轉座子系統質粒的精心優化,使得轉座效率更高,能夠實現外源基因(尤其是大片段基因)的高水平表達,該技術可以替代慢病毒感染法,用于快速構建穩轉細胞株,其特點是:低成本、高效率、可插入大片段基因、基因表達穩定。

基因表達穩轉株構建(轉座子系統)技術優勢
piggyBac載體裝載量大,在5’TR和3’TR之間能攜帶長達27 kb的DNA,可用于大片段目的基因的表達
通過酶促反應插入目的基因,整合效率遠高于DNA隨機插入效率
基因表達穩轉株構建(轉座子系統)實驗流程圖

基因表達穩轉株構建(轉座子系統) * 輝駿服務內容
服務內容 | 交付內容 | 周期 | 價格
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1. 預實驗: 細胞檢測:細胞轉導測試、抗性篩選測試、基因本底檢測 |
1、過表達穩轉細胞株:2個T25瓶(10^6 次方/瓶) 2、空載對照細胞株:2個T25瓶(10^6 次方/瓶) 3、結題報告:質粒構建、細胞篩選、表達檢測等操作和結果 |
6-9周 |
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2. 正式實驗: PiggyBac載體構建、電轉細胞、抗性篩選、RT-qPCR表達檢測、細胞擴大培 養和保存 |
基因表達穩轉株構建 * 輝駿服務優勢

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效果保障,不成功不收費 無效全額退款,100%保證目標基因編輯/表達效果 | 效率保障 快至6周即可交付合格細胞株,高效實驗流程 | 售后保障 實驗疑問隨時快速響應,專業技術團隊全程跟進 |

