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當前位置:首頁 > 科研服務 > 細胞株構建 > 表達細胞株 > 基因表達穩轉株構建(轉座子)
服務介紹

基因表達穩轉株構建(轉座子系統)技術原理


轉座子(transposons)是基因組中的“跳躍者”,能夠作為獨立的單位從基因組的一個位置移動到另一個位置,也被稱為“跳躍基因”。按照轉座機制的不同,可分為反轉錄轉座子和 DNA 轉座子兩類。


DNA轉座子(DNA transposons)通過“剪切-粘貼”機制進行,包括轉座酶表達、移動、插入三個階段。轉座酶識別轉座子兩端的末端重復序列(ITRs),將轉座子從原來的位置解離下來,再重新整合到基因組上。


目前在脊椎動物中應用最多的三大轉座子是:PiggyBac(PB)、睡美人Sleeping Beauty(SB)和Tol2。


輝駿生物利用PiggyBac轉座子系統進行基因表達穩轉株的構建,通過對轉座子系統質粒的精心優化,使得轉座效率更高,能夠實現外源基因(尤其是大片段基因)的高水平表達,該技術可以替代慢病毒感染法,用于快速構建穩轉細胞株,其特點是:低成本、高效率、可插入大片段基因、基因表達穩定。


基因表達穩轉株構建技術原理圖-輝駿生物低成本/高效率/可插入大片段基因.png




基因表達穩轉株構建(轉座子系統)技術優勢


1

piggyBac載體裝載量大,在5’TR和3’TR之間能攜帶長達27 kb的DNA,可用于大片段目的基因的表達

2

通過酶促反應插入目的基因,整合效率遠高于DNA隨機插入效率


3

目的基因表達穩定,可以穩定表達傳代20代


4

比病毒系統安全性更高

5

不需要進行慢病毒包裝等步驟,實驗周期短



聯系技術支持 
18927549347、13430303037





基因表達穩轉株構建(轉座子系統)實驗流程圖


基因表達穩轉株構建(轉座子系統)實驗流程-輝駿生物.png




基因表達穩轉株構建(轉座子系統) * 輝駿服務內容


服務內容

交付內容

周期

價格

1. 預實驗:

細胞檢測:細胞轉導測試、抗性篩選測試、基因本底檢測



1、過表達穩轉細胞株:2個T25瓶(10^6 次方/瓶)
2、空載對照細胞株:2個T25瓶(10^6 次方/瓶)
3、結題報告:質粒構建、細胞篩選、表達檢測等操作和結果



6-9周



點擊詢價


 2. 正式實驗:

 PiggyBac載體構建、電轉細胞、抗性篩選、RT-qPCR表達檢測、細胞擴大培   養和保存




基因表達穩轉株構建 * 輝駿服務優勢


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效果保障,不成功不收費

無效全額退款,100%保證目標基因編輯/表達效果

效率保障

快至6周即可交付合格細胞株,高效實驗流程

售后保障

實驗疑問隨時快速響應,專業技術團隊全程跟進



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